アミダーゼ (AMD)
酵素:高分子の生物学的触媒であり、ほとんどの酵素はタンパク質です
アミダーゼ:アシル基を水に転移させて遊離酸とアンモニアを生成させることにより、さまざまな内因性および外来性の脂肪族および芳香族アミドの加水分解を触媒します。ヒドロキサム酸やその他の有機酸は、成長因子、抗生物質、腫瘍阻害剤の構成成分であるため、医薬品として広く使用されています。アミダーゼは、触媒の立体選択性により、R型アシラーゼとS型アシラーゼに分けることができます。
アミドの加水分解を触媒することに加えて、アミダーゼは、ヒドロキシルアミンなどの補基質の存在下でアシル転移反応を触媒することもできます。
ソースが異なるアミダーゼは異なる基質特異性を持ち、芳香族アミドのみを加水分解できるものもあれば、脂肪族アミドのみを加水分解できるものもあり、α-またはω-アミノアミドを加水分解できるものもあります。ほとんどのアミンは、非環式または単純な芳香族アミドに対してのみ良好な触媒活性を持っていますが、複雑な芳香族、複素環式アミド、特にオルト置換基を持つアミドでは、一般に活性が低くなります (より良い触媒効果を示す酵素はごくわずかです)。
触媒メカニズム:
酵素 | 製品コード | 製品コード |
酵素パウダー | ES-AMD-101~ES-AMD-119 | 19個のアミダーゼのセット、各19個の50mg * 50mg/アイテム、またはその他の量 |
スクリーニングキット (SynKit) | ES-AMD-1900 | アミダーゼ19個セット 各1mg 19個 ※1mg/個 |
★高い基質特異性。
★ 強いキラル選択性。
★変換効率が高い。
★副産物が少ない。
★マイルドな反応条件。
★ 環境にやさしい。
➢ 基質特異性があるため、特定の基質について酵素スクリーニングを行い、最も触媒効果の高い標的基質を触媒する酵素を取得する必要があります。
➢ 高温、高/低 pH、高濃度の有機溶媒などの極端な条件には絶対に触れないでください。
➢ 通常、反応系には基質、緩衝液(酵素の至適反応pH)が含まれます。ヒドロキシルアミンなどの補基質は、アシル転移反応系に存在する必要があります。
➢ AMD は、最適な反応 pH と温度で反応システムに最後に追加する必要があります。
➢ あらゆるタイプの AMD にはさまざまな最適な反応条件があるため、それぞれを個別にさらに検討する必要があります。
例 1(1):
異なるアミド基質への加水分解活性
基板 | 特定の活動 μmol分-1mg-1 | 基板 | 特定の活動 μmol分-1mg-1 |
アセトアミド | 3.8 | ο-OH ベンズアミド | 1.4 |
プロピオンアミド | 3.9 | p-OH ベンズアミド | 1.2 |
ラクタミド | 12.8 | ο-NH2ベンズアミド | 1.0 |
ブチルアミド | 11.9 | p-NH2ベンズアミド | 0.8 |
イソブチルアミド | 26.2 | ο-トルアミド | 0.3 |
ペンタアミド | 22.0 | p-トルアミド | 8.1 |
ヘキサナミド | 6.4 | ニコチンアミド | 1.7 |
シクロヘキサンアミド | 19.5 | イソニコチンアミド | 1.8 |
アクリルアミド | 10.2 | ピコリンアミド | 2.1 |
メタクリルアミド | 3.5 | 3-フェニルプロピオンアミド | 7.6 |
プロリンアミド | 3.4 | インドール-3-アセトアミド | 1.9 |
ベンズアミド | 6.8 |
反応は 50 mM リン酸ナトリウム緩衝液、pH 7.5、70 ℃で行った。
アミド | ヒドロキシルアミン | ヒドラジン |
アセトアミド | 8.4 | 1.4 |
プロピオンアミド | 18.4 | 3.0 |
イソブチルアミド | 25.0 | 22.7 |
ベンズアミド | 9.2 | 6.1 |
反応は 50 mM リン酸ナトリウム緩衝液、pH 7.5、70 ℃で行った。
関連試薬濃度: アミド、100 mM (ベンズアミド、10 mM);ヒドロキシルアミンおよびヒドラジン、400 mM。酵素0.9μM。
例 2(2):
例 3(3):
1. D'Abusco AS、Ammendola S.、他。Extremophiles、2001 年、5:183-192。
2. Guo FM、Wu JP、Yang LR などプロセス生化学、2015 年、50(8): 1400-1404。
3. Zheng RC、Jin JQ、Wu ZM などBioorganic Chemistry、2017 年、オンラインで入手可能 7.